Microbiología de estafilococos patógenos. Diagnóstico microbiológico de Staphylococcus aureus. Microscopía de Staphylococcus aureus. Aislamiento de Staphylococcus aureus. Prueba de coagulasa. Fuentes y factores de transmisión de infección.

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Morfología y propiedades biológicas. Los estafilococos (del griego staphyle, racimo de uvas) tienen la forma de bolas redondas con un diámetro de 0,6 a 1 micras, que están dispuestas en grupos que recuerdan a racimos de uvas. En el material patológico se pueden detectar en forma de cocos individuales, diplococos o cadenas cortas que se encuentran separados. No forman esporas y no tienen flagelos. En algunas cepas de estafilococos se encuentra una cápsula. Bajo la influencia de la penicilina y otras sustancias, los estafilococos pueden formar formas L. Los estafilococos se tiñen bien con tintes de anilina y son grampositivos.

Por tipo de respiración son anaerobios facultativos.. Los estafilococos crecen bien en medios nutritivos simples en diversas condiciones atmosféricas, incluido un 20-30% de dióxido de carbono, formando una toxina fuerte; pH óptimo 7,2-7,8; crecer dentro del rango de 8-43°C con un óptimo de 37°C. El caldo de carne y peptona proporciona una turbidez uniforme con sedimento. En medios densos se forman tamaño promedio(diámetro 2-4 mm) Colonias lisas, redondas, convexas, brillantes, con bordes lisos. Debido a la formación de pigmentos, las colonias pueden ser doradas, amarillas, amarillas limón, crema o blancas. La formación de pigmentos se expresa mejor cuando se inocula con agar leche-sal. El pigmento secretado por estafilococos pertenece a los lipocromos y se disuelve en alcohol, éter, acetona y es insoluble en agua. Por lo tanto, cuando se cultiva en un medio nutritivo, solo se colorean las colonias de estafilococos. Se encuentran colonias sin pigmentos.

Los estafilococos descomponen varios carbohidratos para formar ácido: glucosa, lactosa, manitol, sacarosa, maltosa, forman sulfuro de hidrógeno sobre un sustrato nutritivo, reducen los nitratos a nitritos y licuan la gelatina.

Formación de toxinas. Las propiedades patógenas de los estafilococos se deben a la capacidad de producir exotoxinas y enzimas agresivas. Actualmente, existen cuatro tipos de toxinas estafilocócicas: alfa (a), beta (b), delta (d), gamma (y).

Son sustancias independientes que provocan la lisis de los glóbulos rojos y tienen un efecto letal y necrótico. Estas propiedades no se expresan igualmente en varios tipos toxinas. Las propiedades hemolíticas de las toxinas son las más estudiadas, por lo que a menudo se las llama hemolisinas. La capacidad hemolítica de los estafilococos se puede determinar mediante placas de agar sangre, en las que después de 18 a 24 horas se ve una zona de hemólisis alrededor de la colonia de estafilococos. El efecto necrótico se puede establecer inyectando un cultivo de estafilococos por vía intradérmica en un conejo. Después de 24 a 48 horas, se produce necrosis cutánea en el lugar de la inyección (prueba dermonecrótica positiva). Las propiedades letales se determinan mediante la administración intravenosa de 0,2 a 0,4 ml de toxina estafilocócica a un conejo. La muerte del animal se produce en 5-10 minutos.

La toxina alfa es la más estudiada. Se refiere a verdaderas toxinas. Destruye los eritrocitos de conejo y oveja, débilmente, los eritrocitos humanos. Calor lábil. Tiene un efecto letal y necrótico. Tiene propiedades antigénicas e inmunogénicas y se convierte fácilmente en toxoide.

toxina delta producido principalmente por cepas de estafilococos aislados de material patológico de pacientes. Actúa sobre los glóbulos rojos humanos y de caballo. Provoca la muerte de conejos con la administración intravenosa de 125 mcg de toxina purificada. Las propiedades antigénicas se expresan débilmente y no se traducen en toxoide.

La toxina gamma no se conoce bien. Provoca lisis de eritrocitos en conejos, ovejas y humanos. Calor lábil.

Se ha establecido que los estafilococos patógenos secretan sustancias que tienen un efecto perjudicial sobre los leucocitos de humanos y diversas especies animales. Estas sustancias se llaman leucocidinas. Se han descrito cuatro tipos de leucemia en estafilococos. Tienen propiedades antigénicas. “Al inmunizar animales es posible obtener un suero inmune que tiene la capacidad de neutralizar el efecto leucocitolítico del veneno.

Estafilococos patógenos capaz de producir enterotoxina, que causa intoxicación alimentaria. La intoxicación alimentaria por estafilococos se produce después de ingerir alimentos que contienen enterotoxina liberada por estafilococos durante la reproducción en el producto. Una característica importante de la enterotoxina estafilocócica es su resistencia al calor. Por tanto, los productos que contienen enterotoxina, incluso después del tratamiento térmico, pueden provocar una intoxicación alimentaria.

En los últimos años se ha encontrado una exotoxina especial en algunos estafilococos patógenos, a la que se le denominó Estafilococos que secretan este tipo de toxina y provocan lesiones cutáneas exfoliativas (pénfigo del recién nacido, impétigo ampolloso local, erupción cutánea tipo escarlatina).

Las sustancias tóxicas incluyen enzimas agresivas secretadas por estafilococos:

1) plasmacoagulasa, que provoca la coagulación del plasma sanguíneo;

2) hialuronidasa, que descompone el ácido hialurónico, que forma parte de la sustancia principal del tejido conectivo;

3) fibrinolisina, que disuelve la fibrina;

4) fosfatasa.

Además, se ha establecido que las propiedades patógenas de los estafilococos están asociadas con su capacidad para producir desoxirribonucleasa (ADNasa), lecitovitellasa, lipasa y lisozima. Los estafilococos pueden producir sustancias antibióticas: bacteriocinas (estafilocinas). Se ha establecido que las estafilocinas no solo inhiben el crecimiento de otras cepas de estafilococos, sino que también tienen un efecto inhibidor sobre los bacilos de la difteria, así como diferentes tipos bacilos y clostridios.

Sostenibilidad. Entre los microbios patógenos, los estafilococos son los más resistentes en ambiente externo. Toleran bien la congelación, mantienen la viabilidad durante varios años y se secan, siendo posteriormente una fuente de infección por polvo (transmitida por el aire). La luz solar directa mata los estafilococos en unas pocas horas. Cuando se calientan a 70°C, mueren en 1 hora, a 80°C, después de 10 a 20 minutos. Los estafilococos son menos resistentes a diversos sustancias químicas: una solución de sublimado al 0,1 % y una solución de ácido fénico al 3 % los matan en 15 a 30 minutos, una solución de cloramina al 1 % en 2 a 5 minutos. Los estafilococos son resistentes a concentraciones elevadas de cloruro de sodio. Por tanto, a la hora de aislarlos del material contaminado se utilizan medios nutritivos con un alto contenido de NaCl (7-10%). Los estafilococos se vuelven rápidamente resistentes a los antibióticos. Las cepas resistentes a la penicilina son especialmente comunes, ya que los estafilococos poseen la enzima penicilinasa.

Estructura antigénica. No estudiado lo suficiente. Se han identificado alrededor de 30 antígenos específicos de tipo polisacárido y un antígeno proteico común. Para estos antígenos se obtuvieron sueros aglutinantes y precipitantes. Sin embargo, un número bastante grande de cultivos de estafilococos no son susceptibles de tipificación serológica.

Clasificación. El género de estafilococos, según la clasificación de Bergey (1974), se divide en tres especies:

1) Estafilococo aureus;

2) Estafilococo epidermidis;

3) Estafilococos, saprofitos. El efecto patógeno es causado predominantemente por Staph aureus. Staph, epidermidis y Staph, saprofitos son habitantes permanentes de la piel y las membranas mucosas. Las pruebas comunes para diferenciar estas especies son:

a) reacción de coagulación del plasma;

b) fermentación de manitol en condiciones anaeróbicas.

Staph, aureus coagula el plasma sanguíneo, fermenta el manitol en condiciones anaeróbicas y también produce ADNasa, fibrinolisina, hialuronidasa, lecitovitellasa, fosfatasa y otros factores de patogenicidad. Otras dos especies: Staph, epidermidis y

Staph, saprophyticus: no tienen los principales factores de patogenicidad. La especie Staph, saprophyticus aún no se ha estudiado lo suficiente. Para diferenciar diferentes tipos de estafilococos, actualmente se recomiendan las pruebas que figuran en la Tabla 1. 1.

Se encontraron fagos en Staph, aureus. Existe un conjunto internacional formado por 22 fagos, agrupados en 4 grupos (I, I, III y IV). Utilizando este conjunto de fagos, se realiza la tipificación de fagos de cultivos aislados de Staph y aureus.

Sensibilidad de estafilococos. a uno o más fagos es una característica bastante constante. Es posible tipificar el 75-80% de todos los cultivos de estafilococos patógenos. La tipificación por fagos juega un papel importante en el análisis epidemiológico de las enfermedades estafilocócicas, ayudando a establecer la fuente de infección y determinar las rutas de su propagación.

patogenicidad. De los animales de laboratorio, los conejos son los más sensibles y los conejillos de indias y los ratones blancos son menos sensibles.

Patogénesis y clínica. Como ya se señaló, los estafilococos están muy extendidos en el ambiente externo. Son saprófitos de la piel y las mucosas humanas. En personas sanas, junto con las no patógenas, se encuentran con bastante frecuencia estafilococos patógenos. Su localización predominante es la mucosa de la nariz y la faringe. Se ha demostrado que sólo una pequeña proporción de personas están constantemente libres de estafilococos patógenos en su cuerpo. La mayoría de las personas la padecen periódicamente y algunas personas son portadoras constantes de la bacteria. Existe una categoría de portadores "maliciosos", en cuya nasofaringe estafilococos patógenos resistentes a los antibióticos de ciertos fagotipos viven constantemente en grandes cantidades y se denominan "epidémicos", ya que a menudo son la causa de enfermedades masivas estafilocócicas en los hospitales. Estos portadores, especialmente entre el personal médico y las personas que padecen enfermedades estafilocócicas, son la principal fuente de infecciones estafilocócicas en los hospitales.

Los estafilococos juegan un papel muy importante en la patología. Provocan una amplia variedad de enfermedades purulentas: lesiones pustulosas de la piel y del tejido subcutáneo, amigdalitis, otitis, neumonía, uretritis, colecistitis, enterocolitis, sepsis, etc. Su papel es especialmente importante en la práctica y cirugía obstétrica y ginecológica. Los estafilococos son la causa más común de enfermedades inflamatorias purulentas en los recién nacidos, incluidas infecciones generalizadas: sepsis, mastitis en mujeres en trabajo de parto, complicaciones purulentas después de operaciones en pacientes quirúrgicos. El proceso patológico suele ser causado por estafilococos patógenos. Sin embargo, en individuos con resistencia reducida, el proceso infeccioso puede ser causado por estafilococos no patógenos. Las enfermedades estafilocócicas son graves y con una alta mortalidad, especialmente en niños pequeños y pacientes debilitados.

La infección se transmite principalmente por contacto o por el aire. En algunas enfermedades (enfermedades pustulosas de la piel, amigdalitis, etc.), la infección puede ser endógena.

Entre las enfermedades estafilocócicas, un lugar especial lo ocupa la intoxicación alimentaria que se produce como resultado de ingerir alimentos (con mayor frecuencia lácteos, carne y platos dulces), en los que se multiplican los estafilococos y se acumula la enterotoxina.

Tienen la mayor proporción entre las intoxicaciones alimentarias microbianas. La intoxicación alimentaria por estafilococos se denomina toxicosis, ya que el cuadro clínico característico (vómitos repetidos, dolor de cabeza, debilidad cardíaca, a veces diarrea) no es causada por la acción del estafilococo, sino por su enterotoxina.

Inmunidad. Una persona tiene una resistencia significativa a los efectos de los estafilococos debido a las propiedades protectoras de la piel, la fagocitosis, la presencia de anticuerpos antiestafilococos en individuos sanos y otros factores. Después de una enfermedad, la inmunidad es de corta duración y poco tensa.

En el mecanismo de inmunidad contra estafilococos. el papel principal pertenece factor humoral, en particular la antitoxina estafilocócica, y la protección celular tiene una importancia secundaria. La inmunidad antitóxica adquirida es inestable. Las enfermedades estafilocócicas se caracterizan por una tendencia a la recaída. Como resultado, la resistencia a la infección estafilocócica disminuye varias enfermedades, lesiones, diabetes, radiación, etc.

Diagnóstico microbiológico. El material de investigación es: secreción purulenta, esputo, mocos de garganta y nariz, exudado inflamatorio, orina, sangre, heces, vómito, lavado gástrico, etc.

Esquema de investigación microbiológica..

Primer día:

1) la microscopía del material teñido de Gram permite tener una idea aproximada del tipo de microbio y el grado de contaminación del material;

2) sembrar el material de prueba en caldo salino, en placas con agar leche-sal (o yema-sal) y agar sangre al 5%. Los cultivos se colocan en un termostato a 37°C durante 18 a 24 horas.

Segundo día: visualización de copas con cultivos. En una placa con agar yema y sal, se observa la formación de una zona turbia alrededor de la colonia con una corola arcoíris (en presencia de la enzima lecitovitellasa, se observa hemólisis en agar sangre);

Las colonias sospechosas se examinan microscópicamente y se analizan en agar inclinado para aislar un cultivo puro. El caldo salado se inocula en placas con agar leche-sal o yema-sal. A continuación, examinan cómo se utilizan los cultivos primarios en medios sólidos.

Tercer día: se estudia el cultivo cultivado en agar inclinado, determinando signos de patogenicidad: se realiza una reacción de coagulación del plasma, se inocula en un tubo de ensayo con manitol y se determina la sensibilidad a los antibióticos. Con fines de análisis epidemiológico, se lleva a cabo la tipificación de fagos. Cuarto día: teniendo en cuenta la reacción de coagulación plasmática, fermentación de manitol, sensibilidad a los antibióticos, fagotipado. Los cultivos que coagulan el plasma y fermentan el manitol en condiciones anaeróbicas se clasifican como patógenos.

En caso de intoxicación alimentaria, se realiza una prueba biológica en los gatitos para establecer el papel etiológico de los estafilococos. Para ello, se les alimenta con los restos de la comida que provocó la intoxicación o se les inyecta en el estómago un cultivo aislado de estafilococo a través de una sonda. Si el material de prueba contiene enterotoxina, los gatitos vomitan y tienen diarrea en un plazo de 30 a 60 minutos.

Prevención y tratamiento. La amplia distribución de las enfermedades estafilocócicas está asociada con la intensidad de la circulación de los estafilococos, su importante resistencia en el entorno externo y la selección natural de cepas altamente virulentas y multirresistentes a los antibióticos. Por otro lado, la susceptibilidad a la infección cambia en individuos con una resistencia reducida a la infección. Por tanto, para combatir la infección estafilocócica, es necesario llevar a cabo una serie de medidas en tres direcciones:

1) impacto en la fuente de infección: aislamiento estricto de personas con enfermedades estafilocócicas, saneamiento de portadores de estafilococos patógenos entre el personal médico y los pacientes con lisozima, ecmonovocilina, furatsilina, rivanol, pomada Oxycort y otros medicamentos. Se administran en forma de ungüentos o gotas en la nariz, se utilizan para hacer gárgaras y también para inhalar;

2) supresión de las vías de transmisión de la infección estafilocócica, lo que requiere una serie de medidas destinadas a mejorar el régimen sanitario e higiénico, estricto cumplimiento de la asepsia y antisepsia en las instituciones hospitalarias,

3) aumentar las defensas del macroorganismo, para lo cual se utilizan agentes fortalecedores generales y una serie de fármacos de inmunoterapia específicos. Dichos medicamentos incluyen toxoide estafilocócico, antifagina, vacuna, bacteriófago estafilocócico polivalente, autovacuna, plasma antiestafilocócico y gammaglobulina. El toxoide estafilocócico se utiliza para la inmunización de pacientes embarazadas y quirúrgicas para prevenir complicaciones purulentas posoperatorias.

Para tratar las enfermedades estafilocócicas, se utilizan antibióticos en combinación con fármacos de inmunoterapia.

Taxonomía: pertenece al departamento Firmicutes, familia Micrococcacae, género Staphylococcus. Este género incluye 3 especies: S.aureus, S.epidermidis y S.saprophyticus.

Propiedades morfológicas: Todos los tipos de estafilococos son células redondas. En el frotis se encuentran en grupos asimétricos. La pared celular contiene una gran cantidad de peptidoglicano, ácidos teicoicos asociados a él y proteína A. Son grampositivos. No forman esporas y no tienen flagelos. En algunas cepas se puede encontrar una cápsula. Puede formar formas de L.

Propiedades culturales: los estafilococos son anaerobios facultativos. Crece bien en medios simples. En medios densos forman colonias suaves y convexas con diversos pigmentos que no tienen importancia taxonómica. Puede crecer en agar con alto contenido de NaCl. Tienen enzimas sacarolíticas y proteolíticas. Los estafilococos pueden producir hemolisinas, fibrinolisina, fosfatasa, lactamasa, bacteriocinas, enterotoxinas y coagulasa.

Los estafilococos son flexibles y rápidamente se vuelven resistentes a los medicamentos antibacterianos. Un papel importante en esto lo desempeñan los plásmidos, transmitidos mediante la transducción de fagos de una célula a otra. Los plásmidos R determinan la resistencia a uno o más antibióticos mediante la producción de β-lactamasa.

Estructura antigénica. Alrededor de 30 antígenos, que son proteínas, polisacáridos y ácidos teicoicos. Incluido pared celular Staphylococcus contiene proteína A, que puede unirse firmemente al fragmento Fc de la molécula de inmunoglobulina, mientras que el fragmento Fab permanece libre y puede unirse a un antígeno específico. La sensibilidad a los bacteriófagos (fagotipo) se debe a los receptores de superficie. Muchas cepas de estafilococos son lisogénicas (la formación de algunas toxinas se produce con la participación de un profago).

Factores de patogenicidad: Condicionalmente patógeno. La microcápsula protege contra la fagocitosis y promueve la adhesión microbiana; Componentes de la pared celular: estimulan el desarrollo de procesos inflamatorios. Enzimas de agresión: catalasa: protege a las bacterias de la acción de los fagocitos, β-lactamasa: destruye las moléculas de antibióticos.

Resistencia. Sostenibilidad en ambiente y la sensibilidad a los desinfectantes es normal.

Patogénesis. La fuente de infección estafilocócica son los humanos y algunas especies de animales (pacientes o portadores). Mecanismos de transmisión: respiratorio, contacto domiciliario, nutricional.

Inmunidad: Postinfecciosa - celular-humoral, inestable, átona.

Clínica. Alrededor de 120 formas clínicas de manifestación, que son locales, sistémicas o generalizadas. Estos incluyen enfermedades inflamatorias purulentas de la piel y tejidos blandos (forúnculos, abscesos), lesiones de los ojos, oídos, nasofaringe, tracto urogenital, sistema digestivo(intoxicación).

Diagnóstico microbiológico. Material para la investigación: pus, sangre, orina, esputo, heces.

Método bacterioscópico: se preparan frotis a partir del material de prueba (excepto sangre) y se tiñen con Gram. La presencia de cocos gram “+” en forma de racimos, ubicados en forma de racimos.

Método bacteriológico: El material se inocula en un asa sobre placas de agar sangre y yema-sal para obtener colonias aisladas. Los cultivos se incuban a 37°C durante 24 horas. Al día siguiente, las colonias crecidas se examinan en ambos medios. La presencia o ausencia de hemólisis se observa en agar sangre. En FSA, S. aureus forma colonias doradas, redondas, convexas y opacas. Alrededor de las colonias de estafilococos con actividad lecitinasa se forman zonas de turbidez con un tinte nacarado. Para establecer definitivamente el tipo de estafilococo, se subcultivan 2-3 colonias en tubos de ensayo con agar nutritivo inclinado para obtener cultivos puros, seguido de la determinación de sus características diferenciales. S.aureus - “+”: formación de plasmacoagulasa, leticinasa. Fermentación: glk, minnita, formación de toxina a.

Para establecer la fuente de una infección hospitalaria, se aíslan cultivos puros de estafilococos de pacientes y portadores de bacterias, después de lo cual se tipifican en fagos utilizando un conjunto de estafilófagos estándar. Los fagos se diluyen hasta el título indicado en la etiqueta. Cada uno de los cultivos estudiados se inocula en agar nutritivo en una placa de Petri con césped, se seca y luego se aplica una gota del fago correspondiente en un asa sobre cuadrados (según el número de fagos incluidos en el conjunto), previamente marcados. con un lápiz en el fondo de la placa de Petri. Los cultivos se incuban a 37 °C. Los resultados se evalúan al día siguiente en función de la presencia de lisis del cultivo.

Método serológico: en casos de infección crónica, se determina el título de antitoxina A en el suero sanguíneo de los pacientes. Se determina el título de anticuerpos contra el ácido riboteicoico (componente de la pared celular).

Tratamiento y prevención. Antibióticos de amplio espectro (penicilinas resistentes a beta-lactamasas).

En casos de infecciones estafilocócicas graves que no pueden tratarse con antibióticos, se puede utilizar plasma antiestafilocócico antitóxico o inmunoglobulina inmunizada con toxoide estafilocócico adsorbido.

Identificación y tratamiento de pacientes; realización de un examen de rutina del personal médico, vacunación con toxoide estafilocócico. Toxoide estafilocócico: preparado a partir del toxoide nativo mediante precipitación con ácido tricloroacético y adsorción sobre hidrato de alúmina.

Vacuna estafilocócica: suspensión de estafilococos coagulasa positivos, inactivados por calor. Se utiliza para tratar enfermedades a largo plazo.

Inmunoglobulina humana antiestafilocócica: fracción de gammaglobulina del suero sanguíneo, contiene toxoide estafilocócico. Preparado a partir de humanos. sangre, con un alto contenido de anticuerpos. Se utiliza para tratamientos específicos.

Los estudiantes, estudiantes de posgrado y jóvenes científicos que utilicen la base de conocimientos en sus estudios y trabajos le estarán muy agradecidos.

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Introducción

En la segunda mitad del siglo XX, los estafilococos patógenos, que desplazaron a muchos microorganismos, se convirtieron en los principales agentes causantes de diversas enfermedades graves.

Estos incluyen neumonía, abscesos pulmonares, meningitis, peritonitis, sepsis, endocarditis, enteritis tóxica, inflamación del tracto urinario, enfermedades ginecológicas, complicaciones purulentas después de lesiones y operaciones, otitis, mastitis posparto y otras. Los estafilococos patógenos también pueden causar intoxicación alimentaria, que se manifiesta en forma de brotes epidémicos.

Difícilmente se puede sobrestimar la importancia del estudio de las infecciones estafilocócicas. Debido al aumento generalizado de infecciones estafilocócicas, la investigación diagnóstico de laboratorio y la prevención de enfermedades estafilocócicas es de gran importancia.

En la naturaleza, en el mundo vivo, el medio ambiente, el aire, las variedades de estafilococos patógenos (patógenos) e inofensivos (no patógenos) están muy extendidas. El estafilococo patógeno es un microorganismo indicador sanitario del aire.

Lo más difícil e importante en el estudio de estafilococos, tanto patógenos como no patógenos, es el momento de crecimiento del cultivo. Para aislar un cultivo puro de estafilococos, se necesitan de 2 a 3 días.

El objetivo del trabajo es estudiar el agente causante de los estafilococos y su identificación en el diagnóstico microbiológico.

· Estudiar la morfología de los estafilococos.

· Estudiar las propiedades culturales de los estafilococos.

· Estudiar las propiedades bioquímicas de los estafilococos.

· Estudiar la formación de toxinas y estructura antigénica de estafilococos.

· Estudiar la resistencia de los estafilococos.

· Caracterizar la patogénesis y el cuadro clínico.

· Describir la clasificación.

· Analizar estafilococos hemolíticos.

· Analizar Staphylococcus epidermidis.

· Analizar estafilococos saprófitos.

· Analizar Staphylococcus aureus.

· Hablar sobre métodos de diagnóstico de laboratorio.

Referencia histórica.

El estafilococo patógeno (Staphylococcus aureus) fue descubierto por R. Koch (1878), aislado del pus de un forúnculo por L. Pasteur (1880), descrito como el agente causante de muchos procesos supurativos por A. Auguston (1881) y estudiado en detalle por F. Rosenbach (1884). El nombre estafilococo proviene de la frase griega "racimo de uvas".

1. Características de los estafilococos

Staphylococcus es una bacteria de la familia Micrococcaceae.

El peligro de estos microorganismos es que producen toxinas y enzimas que son patógenas para las células y alteran sus funciones vitales. Las bacterias tienen un efecto destructivo sobre el tejido conectivo, la piel y el tejido subcutáneo. llaman a un numero las enfermedades más peligrosas, entre los que se encuentran la sepsis, el shock tóxico y otros. A menudo, las complicaciones de diversas enfermedades se asocian con una infección estafilocócica.

1.1 Características morfológicas

Todos los tipos de estafilococos tienen forma esférica. Su tamaño varía de una fuente a otra. El tamaño medio oscila entre 0,5 y 2 micras. En los frotis, sus cultivos se disponen en forma de racimos de uvas. En el material patológico se pueden detectar en forma de cocos individuales, diplococos o cadenas cortas que se encuentran separados. No forman esporas y no tienen flagelos. En algunas cepas de estafilococos se encuentra una cápsula. Bajo la influencia de la penicilina y otras sustancias, los estafilococos pueden formar formas L. Los estafilococos se tiñen bien con tintes de anilina y son grampositivos. Son anaerobios facultativos.

1.2 Bienes culturales

Los estafilococos son aerobios y anaerobios facultativos. Se desarrollan bien en medios nutritivos ordinarios a temperaturas de 10°C a 43°C (óptimo 30-37°C) a un pH de 7,2-7,6. El crecimiento también es posible en un ambiente ligeramente ácido. Los estafilococos provocan una turbidez difusa del MPB seguida de la precipitación de un pequeño sedimento. Después de 2-3 días, se forma una película y un anillo en la pared en la superficie del caldo. En MPA, los estafilococos crecen en forma de colonias convexas con bordes lisos y un diámetro de 1 a 4 mm.

A 20-25°C, con acceso al oxígeno y a la luz dispersa, los estafilococos producen pigmentos dorados, blancos, amarillo limón, naranja y otros pigmentos que son lipocromos, catalasa positiva y oxidasa negativa. Crecer en medios con 5-10% de NaCl.

Se han propuesto los siguientes medios selectivos: agar yema-sal, agar leche-sal, etc. El medio más utilizado es JSA (agar yema-sal), que permite identificar colonias de estafilococos patógenos que ya se encuentran en cultivos primarios.

Cuando se cultiva en agar yema-sal, se forman corolas iridiscentes y zonas de turbidez alrededor de las colonias de estafilococos patógenos. En el agar leche-sal, las colonias de estafilococos tienen forma de discos con bordes lisos, formando una variedad de pigmentos (dorados, blancos, etc.).

Debido a la similitud de los estafilococos en morfología y propiedades culturales, las colonias cultivadas en medios nutritivos se inoculan en agar inclinado de extracto de carne y se lleva a cabo la identificación: se realiza una reacción de coagulación del plasma (los estafilococos patógenos capaces de coagular el plasma de conejo con citrato generalmente se lisan por fagos), prueba de catalasa, inoculación en medio carbohidrato con manitol, etc.

Tampoco es confiable determinar los estafilococos patógenos por su capacidad para producir hemólisis cuando crecen en agar sangre. La capacidad hemolítica de estos microbios varía ampliamente dependiendo de una serie de factores: el tipo de sangre utilizada, el contenido de antigoxina, la concentración de eritrocitos en el agar, el grosor de la capa media, etc. Por tanto, el signo hemolítico en la práctica no garantiza la diferenciación de estafilococos piógenos (patógenos) de especies saprofitas. Por lo tanto, en los estudios microbiológicos sanitarios, solo se tienen en cuenta las cepas típicas de estafilococos piógenos coagulasa positivos.

Reacción de coagulación del plasma. Se añade un asa bacteriana de agar o 0,1 cm3 de un caldo de cultivo del microorganismo de prueba de 18 a 24 horas a un tubo de ensayo con 0,5 cm3 de plasma sanguíneo estéril, se incuba a 37°C y se tiene en cuenta el resultado después de 30 minutos, 2,4 y 24 horas En caso de resultado positivo, se forma un coágulo denso o suelto. Si se utilizó plasma diluido, el coágulo flota en el líquido.

1.3 Propiedades bioquímicas

Los estafilococos tienen propiedades sacarolíticas y proteolíticas. Las enzimas sacarolíticas descomponen la lactosa, la glucosa, el manitol, la sacarosa, la maltosa y el glicerol en ácido. Las propiedades proteolíticas de los estafilococos se expresan en la licuación de gelatina, caseína y otras sustancias proteicas.

1.4 Formación de toxinas y estructura antigénica.

Las propiedades patógenas de los estafilococos se deben a la capacidad de producir exotoxinas y enzimas agresivas. Actualmente, existen cuatro tipos de toxinas estafilocócicas: alfa (a), beta (b), delta (d), gamma (y). Son sustancias independientes que provocan la lisis de los glóbulos rojos y tienen un efecto letal y necrótico. Estas propiedades se expresan de manera diferente en diferentes tipos de toxinas. Las propiedades hemolíticas de las toxinas son las más estudiadas, por lo que a menudo se las llama hemolisinas. La capacidad hemolítica de los estafilococos se puede determinar mediante placas de agar sangre, en las que después de 18 a 24 horas se ve una zona de hemólisis alrededor de la colonia de estafilococos. El efecto necrótico se puede establecer inyectando un cultivo de estafilococos por vía intradérmica en un conejo. Después de 24-48 horas, se produce necrosis cutánea en el lugar de la inyección (prueba dermonecrótica positiva). Las propiedades letales se determinan mediante la administración intravenosa de 0,2 a 0,4 ml de toxina estafilocócica a un conejo. La muerte del animal se produce en 5-10 minutos.

La toxina alfa es la más estudiada. Se refiere a verdaderas toxinas. Destruye los glóbulos rojos de conejos y ovejas, destruye débilmente los glóbulos rojos humanos. Calor lábil. Tiene un efecto letal y necrótico. Tiene propiedades antigénicas e inmunogénicas y se convierte fácilmente en toxoide.

La toxina delta es producida principalmente por cepas de estafilococos aisladas del material patológico de pacientes. Actúa sobre los glóbulos rojos humanos y de caballo. Provoca la muerte de conejos con la administración intravenosa de 125 mcg de toxina purificada. Las propiedades antigénicas se expresan débilmente y no se traducen en toxoide.

La toxina gamma no se conoce bien. Provoca lisis de eritrocitos en conejos, ovejas y humanos. Calor lábil.

Se ha establecido que los estafilococos patógenos secretan sustancias que tienen un efecto perjudicial sobre los leucocitos de humanos y diversas especies animales. Estas sustancias se llaman leucocidinas. Se han descrito cuatro tipos de leucemia en estafilococos. Tienen propiedades antigénicas. Al inmunizar animales, es posible obtener suero inmunológico que tiene la capacidad de neutralizar el efecto leucocitolítico del veneno.

Los estafilococos patógenos son capaces de producir enterotoxina, que provoca intoxicación alimentaria. La intoxicación alimentaria por estafilococos se produce después de ingerir alimentos que contienen enterotoxina liberada por estafilococos durante la reproducción en el producto. Una característica importante de la enterotoxina estafilocócica es su resistencia al calor. Por tanto, los productos que contienen enterotoxina, incluso después del tratamiento térmico, pueden provocar una intoxicación alimentaria.

Las sustancias tóxicas incluyen enzimas agresivas secretadas por estafilococos:

1) plasmacoagulasa, que provoca la coagulación del plasma sanguíneo;

2) hialuronidasa, que descompone el ácido hialurónico, que forma parte de la sustancia principal del tejido conectivo;

3) fibrinolisina, que disuelve la fibrina;

4) fosfatasa. Además, se ha establecido que las propiedades patógenas de los estafilococos están asociadas con su capacidad para producir desoxirribonucleasa (ADNasa), lecitovitellasa, lipasa y lisozima. Los estafilococos pueden producir sustancias antibióticas: bacteriocinas (estafilocinas). Se ha establecido que las estafilocinas no solo inhiben el crecimiento de otras cepas de estafilococos, sino que también tienen un efecto inhibidor sobre los bacilos de la difteria, así como sobre varios tipos de bacilos y clostridios.

La estructura antigénica no se ha estudiado lo suficiente. Se han identificado alrededor de 30 antígenos específicos de tipo polisacárido y un antígeno proteico común. Para estos antígenos se obtuvieron sueros aglutinantes y precipitantes. Sin embargo, un número bastante grande de cultivos de estafilococos no son susceptibles de tipificación serológica.

1.5 Estabilidad en el entorno externo

El estafilococo se encuentra en los riñones, el aire, el agua y los artículos del hogar.

Entre los microbios patógenos, los estafilococos son los más resistentes en el ambiente externo. Toleran bien la congelación, mantienen la viabilidad durante varios años y se secan, siendo posteriormente una fuente de infección por polvo (transmitida por el aire). La luz solar directa mata los estafilococos en unas pocas horas. Cuando se calientan a 70°C, mueren en 1 hora, a 80°C, después de 10 a 20 minutos. Los estafilococos son menos resistentes a la acción de diversos productos químicos: una solución de sublimado al 0,1% y una solución de ácido carbólico al 3% los matan en 15 a 30 minutos, una solución de cloramina al 1%, después de 2 a 5 minutos. Los estafilococos son resistentes a concentraciones elevadas de cloruro de sodio. Por tanto, a la hora de aislarlos del material contaminado se utilizan medios nutritivos con un alto contenido de NaCl (7-10%). Los estafilococos se vuelven rápidamente resistentes a los antibióticos. Las cepas resistentes a la penicilina son especialmente comunes, ya que los estafilococos poseen la enzima penicilinasa. Los estafilococos son sensibles al verde brillante.

1.6 Patogenia y clínica

Como ya se señaló, los estafilococos están muy extendidos en el ambiente externo. Son saprófitos de la piel y las mucosas humanas. En personas sanas, junto con las no patógenas, se encuentran con bastante frecuencia estafilococos patógenos. Su localización predominante es la mucosa de la nariz y la faringe. Se ha demostrado que sólo una pequeña proporción de personas están constantemente libres de estafilococos patógenos en su cuerpo.

La mayoría de las personas la padecen periódicamente y algunas personas son portadoras constantes de la bacteria. Existe una categoría de portadores "maliciosos", en cuya nasofaringe estafilococos patógenos resistentes a los antibióticos de ciertos fagotipos viven constantemente en grandes cantidades y se denominan "epidémicos", ya que a menudo son la causa de enfermedades masivas estafilocócicas en los hospitales. Estos portadores, especialmente entre el personal médico y las personas que padecen enfermedades estafilocócicas, son la principal fuente de infecciones estafilocócicas en los hospitales.

La infección se transmite principalmente por contacto o por el aire. En algunas enfermedades (enfermedades pustulosas de la piel, amigdalitis, etc.), la infección puede ser endógena.

Tienen la mayor proporción entre las intoxicaciones alimentarias microbianas. La intoxicación alimentaria por estafilococos se denomina toxicosis, ya que el cuadro clínico característico (vómitos repetidos, dolor de cabeza, debilidad cardíaca, a veces diarrea) no es causado por la acción del estafilococo, sino por su enterotoxina.

1.7 Clasificación

· Staphylococcus aureus (Staphylococcus aureus), como el más patógeno para el ser humano. Llamado así por su capacidad para formar un pigmento dorado. Puede provocar procesos inflamatorios purulentos en humanos en casi todos los órganos y tejidos.

· Staphylococcus epidermidis: se encuentra a menudo en la piel y las membranas mucosas humanas y puede causar sepsis, endocarditis, conjuntivitis, infecciones purulentas de heridas e infecciones purulentas del tracto urinario.

· Estafilococo saprofito (Staphylococcus saprophyticus): puede causar cistitis aguda y uretritis.

Estafilococo hemolítico (Staphylococcus haemolyticus)

1.8 Estafilococo hemolítico

El estafilococo hemolítico (Staphylococcus haemolyticus), según las estadísticas, provoca amigdalitis y dolor de garganta en el cincuenta por ciento de los casos. Esto se debe al hecho de que las membranas mucosas del tracto respiratorio se ven afectadas principalmente. La irritación acelera el proceso inflamatorio. Según los expertos, es casi imposible deshacerse por completo de este microorganismo. El tratamiento para Staphylococcus hemolyticus tiene como objetivo aliviar los síntomas. Durante la terapia, se suprime la actividad de las bacterias patológicas. Cabe señalar que en la práctica médica, el estafilococo hemolítico se encuentra con menos frecuencia que el estafilococo dorado. Es este último el que es la causa principal de varios procesos purulentos. Las patologías, en particular, incluyen neumonía, mastitis y otitis. Los estafilococos a menudo causan intoxicación alimentaria. Externamente, la infección puede ir acompañada de una erupción.

Cuadro clínico de la enfermedad. El estafilococo en la nasofaringe o las amígdalas, por regla general, se encuentra en un estado tranquilo de "sueño". Pero varios factores (hipotermia, por ejemplo) pueden activarlo y provocar la reproducción. El período de incubación suele durar unas cuarenta y ocho horas.

Durante este tiempo, los microorganismos se asientan activamente en la laringe y se propagan por toda la zona. Sistema respiratorio. Después de esto, comienzan a aparecer los síntomas clínicos de la patología. En particular, el paciente siente dolor de garganta, que se vuelve más intenso al estornudar, tragar, toser o hablar. Las amígdalas también aumentan de tamaño y es probable que la temperatura aumente. El paciente puede sentirse débil y mal. Se observa enrojecimiento de la piel en el área de la garganta. Además, es probable que se desarrollen complicaciones: aparición de otitis media, escarlatina e inflamación de los ganglios del cuello.

Terapia. El alivio de los síntomas se logra mediante medicamentos antibacterianos. Sin embargo, cabe señalar que los microorganismos tienen la capacidad de acostumbrarse rápidamente a los medicamentos. En este sentido, a la hora de diagnosticar se debe definir claramente la cepa de la bacteria. Además, durante la terapia a largo plazo, es aconsejable cambiar de fármaco periódicamente. El estafilococo hemolítico a menudo se activa durante el embarazo. En este caso, se prescriben medicamentos según el período. Los médicos recetan antibióticos suaves. Además, se recomiendan medicamentos tópicos para aliviar los síntomas. Dichos remedios incluyen varias gotas nasales, enjuagues e irrigaciones de garganta. Después del curso terapéutico, el médico prescribe una prueba: cultivo bacteriano. Incluso si se encuentra un microorganismo, esto no significa que se esté produciendo una enfermedad grave. En tales casos, los expertos recomiendan mejorar la salud aumentando la inmunidad. Durante el embarazo conviene incluir más verduras y frutas (frescas) en su dieta, evitar los nervios, situaciones estresantes, Estados emocionales. No debemos olvidar que cada persona es atacada por millones de bacterias patológicas. Cabe decir que el estafilococo hemolítico no siempre requiere el uso de antibióticos. Dependiendo de la etapa de la patología, el médico seleccionará la terapia adecuada.

El estafilococo saprofito (Staphylococcus saprophyticus) se considera el más pacífico y rara vez afecta a los niños. Su hábitat principal es la pared. Vejiga y la piel cerca de los genitales, por lo que es fácil adivinar que es el agente causante de la cistitis, a la que las mujeres son más susceptibles.

Y aunque, según las estadísticas, este microorganismo se encuentra en el 5% de los examinados, no provoca ninguna enfermedad en todos. Si una persona tiene un sistema inmunológico fuerte, entonces solo es portador de estafilococos. Si las funciones protectoras del cuerpo se debilitan, las bacterias comienzan a multiplicarse activamente, lo que se manifiesta por los síntomas estándar de la cistitis:

· trastornos de la micción (incontinencia urinaria y necesidad frecuente);

Dolor al orinar;

· dolor ardiente en el perineo y picazón;

· Los síntomas generales de intoxicación son posibles, como mareos, debilidad, náuseas, etc., pero no le molestan con tanta frecuencia.

En casos raros, el estafilococo saprofito puede causar inflamación en los riñones y la pielonefritis debe tratarse junto con la cistitis.

2. Tratamiento de estafilococos

El tratamiento del Staphylococcus saprophyticus se reduce al uso de los antibióticos indicados, sin mencionar el tratamiento sintomático obvio, que incluye duchas vaginales, baños tibios y el uso de remedios a base de hierbas. Sin embargo, es necesario tomar el tratamiento con antibióticos lo más en serio posible y beberlo hasta el final, incluso si los síntomas dolorosos han dejado de molestarle. La inhibición de los estafilococos conduce a un aumento de las bacterias tóxicas debido al hecho de que el cuerpo las necesita. para eliminar los microorganismos muertos y los productos tóxicos de su actividad vital con un solo uso de antibióticos, la mayoría de los estafilococos mueren y los microorganismos restantes ya no pueden multiplicarse y "atacar" con la misma fuerza, razón por la cual. el paciente siente alivio. Sin embargo, si deja de tomar antibióticos, es posible una rápida recaída de la enfermedad, que será mucho más difícil de curar.

El hecho es que los estafilococos restantes se vuelven resistentes, es decir. resistente a este medicamento, y es necesario utilizar medicamentos más fuertes con posibles efectos secundarios sistémicos. Además, cada mutación posterior del estafilococo solo aumenta su capacidad para sobrevivir en las condiciones más difíciles.

Tratamiento de estafilococos saprofitos durante el embarazo.

Este tipo de bacteria se manifiesta especialmente durante el embarazo, ya que esto se ve facilitado por una inmunidad debilitada, alterada. fondo hormonal y exposición a diversas tensiones. En principio, si se manifiesta en forma de cistitis leve, en ocasiones se puede arreglárselas con un tratamiento sintomático. Sin embargo, si una mujer está en riesgo, es decir Si antes del embarazo padecía cistitis grave o incluso pielonefritis, es necesario iniciar un tratamiento completo con antibióticos suaves.

En el tercer trimestre, no son tan peligrosos para el bebé debido a la placenta formada, que es capaz de rechazar influencias patológicas. Pero la propagación dañina del estafilococo puede ser mucho más peligrosa, por lo que cuando aparecen los primeros síntomas de cistitis, es necesario que lo examine un especialista calificado.

Staphylococcus epidermidis.

Staphylococcus epidermidis (Staphylococcus epidermidis), a diferencia de Staphylococcus aureus, es un representante de la microflora normal de la piel humana, por lo que prácticamente no es capaz de causar daño a una persona sana. Se desarrolla principalmente en personas debilitadas, demacradas, con disbiosis, mujeres embarazadas y quienes han sido sometidos recientemente a una cirugía o se encuentran en unidades de cuidados intensivos. El microbio ingresa al cuerpo a través de heridas, catéteres vasculares y urinarios y drenajes. En este sentido, puede producirse una intoxicación de la sangre o una inflamación de la mucosa interna del corazón (endocarditis). Por lo tanto, Staphylococcus epidermidis sirve como castigo principal para muchos cirujanos involucrados en prótesis internas. Porque si los vasos sanguíneos y las válvulas artificiales se infectan es con este microbio.

La infección durante la implantación suele permanecer oculta durante mucho tiempo. En pacientes con neuropenia, se desarrolla bacteriemia masiva con intoxicación grave, que puede provocar la muerte. La infección de los implantes vasculares conduce al desarrollo de falsos aneurismas, que posteriormente también pueden poner en peligro la vida del paciente.

En las mujeres, cuando se infecta con estafilococos epidérmicos, la uretra se ve afectada, provocando inflamación de los tejidos superficiales. En primer lugar, aparece un dolor desagradable en la zona abdominal, la temperatura corporal alcanza los 40 grados, la salud empeora y pueden aparecer diversas erupciones en la piel en forma de acné. En caso de complicaciones, se requiere hospitalización urgente. Pero primero, el médico debe realizar un diagnóstico completo de la enfermedad y luego, teniendo en cuenta la fuerza del impacto del estafilococo, prescribir un tratamiento con medicamentos auxiliares (enzimas, vitaminas y otros).

Tratamiento del estafilococo epidérmico.

Mayoría La mejor manera Protegerse contra las enfermedades es mantener la higiene personal. Tratamiento de enfermedades estafilocócicas - bastante tarea difícil, ya que no existe ningún microbio que pueda compararse en su capacidad para desarrollar resistencia a agentes antibacterianos y antibióticos. El uso de penicilina demostró este hecho. De esto se deduce que el uso de antibióticos no es en absoluto necesario, como lo demuestra el caso de intoxicación alimentaria. Esta enfermedad estafilocócica no requiere antibióticos, ya que no es el microbio el que juega un papel más importante, sino sus toxinas.

Actualmente, los nuevos métodos bacteriológicos permiten no solo detectar Staphylococcus epidermidis, sino también determinar la sensibilidad a los fármacos. Según estos métodos, el médico prescribe la terapia adecuada.

Lo triste es que una infección pasada no deja inmunidad a largo plazo. Muy pronto, con un sistema inmunológico debilitado, una persona puede volver a enfermarse. Los anticuerpos aparecen contra las toxinas de un estafilococo, que el cuerpo aún no puede detectar.

Estafilococo aureus.

Muy a menudo, Staphylococcus aureus (Staphylococcus aureus) se forma en las fosas nasales y el área axilar. Los portadores crónicos son trabajadores médicos, pacientes con dermatitis atópica y drogadictos.

En personas sanas, el principal refugio de estafilococos es la cavidad nasal. Aunque puede ser que vivan en la laringe, perineo, región axilar, tracto gastrointestinal y cuero cabelludo.

El 20% de los niños menores de 2 años pueden ser portadores de Staphylococcus aureus. La infección se asienta en la cavidad nasal. Ya entre los 4 y 6 años, esto se manifiesta en el 30-50% de los niños. En los adultos, el porcentaje de portadores oscila entre el 12% y el 50%.

Después de la hospitalización, el porcentaje de pacientes fluctúa entre 20 y 30. Esto se aplica más a aquellos pacientes que han tomado antibióticos, tienen diabetes o alguna enfermedad infecciosa, o están en hemodiálisis. En los hospitales, las cepas de Staphylococcus aureus son responsables de la inflamación purulenta y de las infecciones de las heridas. Las infecciones de las heridas pueden ser causadas por estafilococos en las fosas nasales.

Entre los trabajadores de hospitales y clínicas, el porcentaje de trabajadores portadores de Staphylococcus aureus alcanza el 35%.

Después de la primera menstruación en las mujeres, pueden aparecer estafilococos en entre el 5 y el 15 por ciento de los casos. Durante la menstruación, este porcentaje aumenta y puede llegar hasta el 30% de las mujeres.

Algunas cepas han desarrollado resistencia a antibióticos como las cefalosporinas y las penicilinas (oxacilina, nafcilina, dicloxacilina, meticilina). También se les llama Staphylococcus aureus resistente a la meticilina. Y cada año crece el número de estas cepas. Puedes contraer la infección en cualquier lugar público. Su tasa de mortalidad es del 30%.

Detección de estafilococos.

La cantidad de Staphylococcus aureus se puede determinar mediante una prueba de heces para detectar disbacteriosis. Los controles se llevan a cabo en casos de sospecha, en las maternidades y durante los exámenes periódicos del personal médico. Dado que Staphylococcus aureus es el único estafilococo patógeno coagulasa positivo, la prueba se realiza con una prueba de coagulasa.

Grados de Staphylococcus aureus.

En medicina, se considera normal si se detecta estafilococo en etapa 4 según los resultados de las pruebas, dicho resultado requiere un tratamiento mínimo;

Incluye acciones preventivas, mantenimiento de la inmunidad y eliminación de la deficiencia de vitaminas.

Los estafilococos identificados de 10 a 4 grados no son muy peligrosos, pero aún así se requiere tratamiento, especialmente porque Staphylococcus aureus es el más difícil de curar, a diferencia de otros. En primer lugar, es necesario prevenir la adicción al antibiótico, que sólo le recetará un médico, y en segundo lugar, es necesario mantener el sistema inmunológico en buen estado, lo que implicará la restauración de la microflora en el cuerpo. El tratamiento debe completarse hasta el final; de lo contrario, el Staphylococcus aureus restante sobrevivirá y se volverá invulnerable a este tratamiento.

Síntomas de Staphylococcus aureus.

Staphylococcus aureus causa procesos purulentos e inflamatorios no solo en la piel, sino también en varios órganos, manifestándose en forma de granos, forúnculos, ántrax, erupciones cutáneas y mastitis purulenta en el pecho de una madre lactante. Si la infección llega a la membrana mucosa de la nasofaringe, esto puede ser la causa del desarrollo de dolor de garganta, sinusitis, otitis y otras enfermedades del tracto respiratorio superior. Si la infección llega a los pulmones de un recién nacido, puede causar neumonía grave; si los huesos se ven afectados, causará osteomielitis, los riñones, pielonefritis del corazón, endocarditis y esta lista continúa. Lo peor que puede pasar es una intoxicación de la sangre, que provocará sepsis. Esto podría ser sepsis umbilical, pénfigo, también llamado "síndrome del bebé escaldado", es decir, lesiones cutáneas purulentas generalizadas.

Si el estafilococo ingresa al intestino, esto se manifiesta en una alteración del tracto gastrointestinal y se produce una intoxicación. La inmunidad a la enfermedad no se forma, por lo que se debe tener cuidado al volver a infectarse.

Signos que indican una infección estafilocócica:

· Además de forúnculos, espinillas y otros varias violaciones En la piel, puede haber una inflamación similar a la escarlatina. Esto indica daño interno al cuerpo, osteomielitis, por ejemplo, sepsis. Hay que tener cuidado con la sepsis maligna, ya que puede provocar incluso sepsis cerebral.

· El curso es agudo y rápido, se produce fiebre intensa, se puede desarrollar dificultad para respirar, hiperemia y taquicardia. No se puede descartar la neumonía.

· Puede producirse mastitis purulenta en el pecho de una madre lactante. En este caso, se detiene la alimentación.

· En el día 5-6 la temperatura y la intoxicación intestinal aumentan bruscamente.

· Si se presenta dolor de garganta causado por estafilococos, parece estreptocócico, pero no se trata con penicilina.

Sepsis a largo plazo

· Choque tóxico

Tratamiento de Staphylococcus aureus.

Esta tarea es muy difícil, pero real. Hay que tener paciencia y no dejarlo pasar. Una vez realizada una prueba de sensibilidad a los antibióticos, el médico debe prescribir un tratamiento integral. El tratamiento lo lleva a cabo un dermatovenerólogo. Generalmente se utilizan sulfamidas y antibióticos. Dado que Staphylococcus aureus tiene la característica de desarrollar resistencia a los antibióticos, el tratamiento no es una tarea fácil, especialmente si el cuerpo no se daña por primera vez.

Después de completar el curso del tratamiento, se repiten las pruebas y, si se produce una recuperación completa, se suspende el tratamiento. Si tiene estafilococos en etapa 4, entonces debe someterse a medidas preventivas, eliminar las deficiencias de vitaminas, observar las normas de higiene personal, evitar lesiones y controlar la sudoración.

Diagnóstico de laboratorio.

Métodos de búsqueda:

1. microscópico

2. Bacteriológico

Material para la investigación:

1) Pus - con forúnculos, ántrax, abscesos;

2) Moco de la garganta - para el dolor de garganta;

3) Esputo - para neumonía;

4) Orina para cistitis;

5) Contenido duodenal - para colecistitis;

6) Sangre - si se sospecha sepsis;

7) Agua de lavado gástrico, restos de comida si se sospecha intoxicación alimentaria;

8) Secreción de la herida.

El método microscópico se utiliza como un fragmento del método bacteriológico.

Método de investigación bacteriológica.

Primer día.

El biomaterial extraído del paciente se envía al laboratorio microbiológico.

A continuación, el biomaterial se inocula en YSA (agar yema-sal), MSA (agar leche-sal) y agar sangre. Colocar en un termostato a 37C durante 24 horas. Si se sospecha sepsis, se inocula sangre en una cantidad de 10 a 15 ml en frascos con caldo de azúcar 1:10 en medio Kitt-Tarozzi para aislar estafilococos anaeróbicos y se coloca en un termostato durante 24 horas a una temperatura de 37 ° C. Durante 20 días, las inoculaciones se realizan en agar sangre.

Segundo día.

Estudio de bienes culturales:

a) en LSA, estafilococos patógenos: se forma una turbidez en forma de corola iridiscente (color perla) alrededor de la colonia, porque la lecitovitelasa estafilocócica descompone la lecitina del medio nutritivo;

b) en MCA: las colonias son de color amarillo, amarillo limón o blanco.

c) en el KA de la zona de hemólisis.

Las colonias sospechosas se subcultivan en MPA (agar con peptona de carne) para aislar un cultivo puro.

El tercer día

1. Determinar la pureza del cultivo aislado - teñir la preparación con estafilococos Gram - en el frotis - cocos Gr +, dispuestos en forma de racimos de uvas.

2. Determinar propiedades patógenas:

a) se realiza una reacción de coagulación del plasma a partir de un cultivo puro; para ello, se diluye plasma de conejo citratado 1:5 con solución fisiológica, luego se vierten 0,5 ml en 2 tubos de ensayo y se introduce en el tubo de ensayo un cultivo puro de estafilococos; bucle bacteriológico, el segundo tubo de ensayo es de control (sin inoculación). La reacción se registra después de 2,6 y 18 horas (el estafilococo patógeno produce la enzima coagulasa y provoca la coagulación del plasma, un precipitado gelatinoso; no se produce coagulación en el tubo de control);

b) siembra sobre LSA - registro de la corola de nácar;

c) siembra en MPA con manitol al 1%: se realiza una inyección en una columna;

d) cultivo en KA - para identificar propiedades hemolíticas.

3. Tipificación de fagos: para identificar la fuente de infección. Para ello se utilizan 20 fagos estándar. El fondo de la placa de Petri está dividido en 20 cuadrados idénticos. Se vierte MPA con glucosa en una placa de Petri. Se siembra un cultivo puro de estafilococos en un césped continuo y se introduce un fago típico en cada cuadrado. Colocar en un termostato a 37C durante 24 horas.

4. Siembra del cultivo en AMP: para determinar las propiedades culturales.

5. Sembrar un cultivo de estafilococos en un césped continuo para determinar la sensibilidad a los antibióticos.

Cuarto día.

Contabilidad de resultados e identificación del cultivo seleccionado:

1. La reacción de coagulación del plasma es positiva;

2. En JSA hay una corola nacarada alrededor de la colonia;

3. Descomposición del manitol en condiciones anaeróbicas (cambio de color del medio);

4. En la nave espacial alrededor de la colonia hay una zona de hemólisis;

5. Lisis de bacterias en el cuadrado correspondiente al fago;

6. Opacificación difusa en el MPB;

7. Determinación de la zona de retraso del crecimiento, teniendo en cuenta la sensibilidad a los antibióticos.

Dando una respuesta: Se aisló Staphylococcus aureus (patógeno).

Conclusión

toxina estafilocócica patógena clínica

A pesar de que los estafilococos se encuentran entre los microorganismos más fáciles de detectar y reconocer y no requieren técnicas de diagnóstico complejas para su identificación, en trabajo practico Los microbiólogos todavía tienen algunas dificultades para establecer su papel causal en varias enfermedades diferentes. Por un lado, la presencia de estafilococos patógenos encontrados en el material estudiado no siempre es una prueba convincente de su importancia etiológica. Por otro lado, dada la amplia variedad de manifestaciones de la actividad biológica de estos microbios, dependiendo de diversos factores que no siempre se pueden tener en cuenta, su amplia variabilidad bajo la influencia de sustancias medicinales y el propio macroorganismo, puede resultar bastante difícil. para determinar su patogenicidad potencial Finalmente, la tercera razón se debe al hecho de que los estafilococos son representantes de la microflora normal del grupo de microorganismos condicionalmente patógenos y, junto con los no patógenos, los representantes patógenos viven en el cuerpo humano y se propagan de manera muy desigual. a lo largo de Diferentes areas cuerpo humano.

Bibliografía

1) Fundamentos de microbiología, virología e inmunología K.S. Kamysheva.

2) Microbiología médica - Pozdeev Oscar Kimovich.

3) Microbiología médica tutorial- SOY. Korliuk.

4) Microbiología - F.K. Cherkes, L.B. Bogoyavlensk.

Publicado en Allbest.ru

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Fosfatasa alcalina

Más del 20% de las cepas

5-10% cepas

95-100% cepas

S. saprophyticus

Tipos y vías de transmisión de estafilococos. Manifestaciones clínicas de anaerobios facultativos. Métodos modernos diagnóstico de la enfermedad. Enfoque moderno para el tratamiento de infecciones estafilocócicas. Fortalecimiento de la inmunidad humana, cumplimiento de las normas sanitarias e higiénicas.

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1. Estafilococos, sus propiedades. Clasificación, factores de patogenicidad de estafilococos. Enfermedades causadas por estafilococos. Epidemiología y características de las cepas hospitalarias de estafilococos. Diagnóstico de laboratorio, prevención y terapia específicas. .

El más famoso:

Staphylococcus aureus es el más patógeno para los humanos. Llamado así por su capacidad para formar un pigmento dorado. Puede provocar procesos inflamatorios purulentos en humanos en casi todos los órganos y tejidos.

Staphylococcus epidermidis, que a menudo se encuentra en la piel y las membranas mucosas humanas, puede causar sepsis, endocarditis, conjuntivitis, infección purulenta de heridas e infecciones purulentas del tracto urinario.

Estafilococo saprofito (Staphylococcus saprophyticus): puede causar cistitis aguda y uretritis.

Taxonomía: Pertenecen al departamento Firmicutes, familia Micrococcacae, género Staphylococcus. Este género incluye 3 especies: S.aureus, S.epidermidis y S.saprophyticus.

Bienes culturales: Los estafilococos son anaerobios facultativos. Crece bien en medios simples. En medios densos forman colonias suaves y convexas con diversos pigmentos que no tienen importancia taxonómica. Puede crecer en agar con alto contenido de NaCl. Tienen sacarolíticos

kimi y enzimas proteolíticas. Los estafilococos pueden producir hemolisinas, fibrinolisina, fosfatasa, lactamasa, bacteriocinas, enterotoxinas y coagulasa.

Estructura antigénica. Alrededor de 30 antígenos, que son proteínas, polisacáridos y ácidos teicoicos. La pared celular de los estafilococos contiene proteína A, que puede unirse firmemente al fragmento Fc de la molécula de inmunoglobulina, mientras que el fragmento Fab permanece libre y puede unirse a un antígeno específico. La sensibilidad a los bacteriófagos (fagotipo) se debe a los receptores de superficie. Muchas cepas de estafilococos son lisogénicas (la formación de algunas toxinas se produce con la participación de un profago).

Factores de patogenicidad: Condicionalmente patógeno. La microcápsula protege contra la fagocitosis y promueve la adhesión microbiana; Componentes de la pared celular: estimulan el desarrollo de procesos inflamatorios. Enzimas de agresión: catalasa – protege a las bacterias de la acción de los fagocitos, β-lactamasa – destruye las moléculas de antibióticos.

Resistencia. Es común la resistencia en el medio ambiente y la sensibilidad a los desinfectantes.

Inmunidad: P ostinfeccioso – celular-humoral, inestable, sin carga.

Clínica. Alrededor de 120 formas clínicas de manifestación, que son locales, sistémicas o generalizadas. Estos incluyen enfermedades inflamatorias purulentas de la piel y tejidos blandos (forúnculos, abscesos), daños en los ojos, oídos, nasofaringe, tracto urogenital y sistema digestivo (intoxicación).

Diagnóstico microbiológico . Material para la investigación: pus, sangre, orina, esputo, heces.

Método bacterioscópico: Se preparan frotis a partir del material de prueba (excepto sangre) y se tiñen con Gram. La presencia de cocos gram “+” en forma de racimos, ubicados en forma de racimos.

Método bacteriológico: El material se inocula en un asa sobre placas de agar sangre y yema-sal para obtener colonias aisladas. Los cultivos se incuban a 37°C durante 24 horas. Al día siguiente, las colonias crecidas se examinan en ambos medios. La presencia o ausencia de hemólisis se observa en agar sangre. En FSA, S. aureus forma colonias doradas, redondas, convexas y opacas. Alrededor de las colonias de estafilococos con actividad lecitinasa se forman zonas de turbidez con un tinte nacarado. Para establecer definitivamente el tipo de estafilococo, se subcultivan 2-3 colonias en tubos de ensayo con agar nutritivo inclinados para obtener cultivos puros, seguido de la determinación de sus características diferenciales. S.aureus – “+”: formación de plasmacoagulasa, leticinasa. Fermentación: glk, minnita, formación de toxina a.

Tratamiento y prevención. Antibióticos de amplio espectro (penicilinas resistentes a beta-lactamasas). En casos de infecciones estafilocócicas graves que no pueden tratarse con antibióticos, se puede utilizar plasma antiestafilocócico antitóxico o inmunoglobulina inmunizada con toxoide estafilocócico adsorbido. Identificación y tratamiento de pacientes; realización de un examen de rutina del personal médico, vacunación con toxoide estafilocócico. Toxoide estafilocócico: obtenido del toxoide nativo por precipitación con ácido tricloroacético y adsorción sobre hidrato de óxido de aluminio.

Vacuna estafilocócica: una suspensión de estafilococos coagulasa positivos inactivados por calor. Se utiliza para tratar enfermedades a largo plazo.

Inmunoglobulina humana antiestafilocócica : fracción de gamma globulina del suero sanguíneo, contiene toxoide estafilocócico. Preparado a partir de humanos. sangre, con un alto contenido de anticuerpos. Se utiliza para tratamientos específicos.

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Estafilococosis en hospitales 40-60%

Actualmente, el género Staphylococcus ya no pertenece a la familia Micrococcaceae (desde principios de los años 90). La familia Micrococcaceae no existe (porque no existe relación genética entre sus componentes). Se unieron únicamente sobre la base de cocos aeróbicos y anaeróbicos facultativos grampositivos, que se dividieron en varios planos.

Micrococcus es un pariente genético de los actinomicetos.

Staphylococcus es un pariente genético de Clostridia.

Al estudiar Fusobacteria, Pravotella, Bacteroides (anaerobios estrictos) en un ambiente sin oxígeno, si no se utiliza un medio con antibióticos (aminoglucósidos), los estafilococos (y las enterobacterias) lo matarán todo.

Método de siembra exhaustivo.

Los estafilococos son anaerobios facultativos. Micrococcus – aerobios estrictos

Diferenciación: prueba de descomposición aeróbica y anaeróbica de la glucosa. Todos los Staphylococcus glucosa+ sin gas bajo aceite de vaselina. Micrococo - no.

Staphylococcus: más de 30 especies, con 44 subespecies. Se diferencian mediante 33 pruebas.

El límite de halotolerancia es un ambiente con 7,5% o más de NaCl.

Micrococcus: sigue creciendo al 6,5%, y solo Staphylococcus es mayor. (JSA – 10% NaCl). Algunos tipos 15% NaCl.

Agar leche-sal: los micrococos crecen porque Allí el NaCl es más bajo.

La burguesía utiliza el medio de Chapman: agar manitol-sal (1% manitol) - 7,5% NaCl. Manitol=manitol, como glicerol=glicerol

Aislamiento dirigido de estafilococos (por ejemplo, durante estudios sanitarios y bacteriológicos). Zona de coloración amarillenta por formación de ácido. Como alternativa, tenemos ZhSA.

Aquellos. si aislamos cocos en un medio con ≥ 7,5 NaCl, entonces siempre son glucosa+, porque esto es Staphylococcus y Micrococcus no crece

La morfología de los micrococos es ligeramente diferente de la de los estafilococos, tanto en colonias como en células. más grande que el de los estafilococos.

Cada persona tiene de 7 a 10 tipos de micrococos en la piel (y hay alrededor de 15 especies en total), predomina M. luteus: grandes colonias amarillas en medios no inhibidores (el nombre antiguo es sarcina aérea, la verdadera sarcina no crece en condiciones aeróbicas!!!). Se tiñen uniformemente según Gram. En forma de montones, cuadernos, paquetes. Otros son blancos, incoloros, etc. M.livi – esmalte blanco. M.cristi - colonias rojas.

Los estafilococos se tiñen de manera desigual según Gram (tinción de calicó). Racimos: producidos con mayor frecuencia por S. aureus, así como montones, tétradas, bolsas, etc. Estafilococos con sustancias líquidas: solteros, pares, grupos.

En medios sin yema, no se forma pigmento de S. aureus y las colonias son grises.

Los carotenoides no se disuelven en agua y el ambiente alrededor de la colonia nunca se colorea en Staphylococcus y Micrococcus.

Angelina Hess: introdujo el agar en los medios a mediados del siglo XIX.

Micrococcus también es UPMF - sepsis. In vitro sensible a todo. En animales, la penicilina (5 unidades por inyección) al nivel de la invención de la penicilina trata la sepsis. Pero el tratamiento in vivo es muy difícil. Sepsis en pacientes con cirugía de bypass cardíaco. Si terminan en una máquina de circulación extracorpórea.

Planococcus – no nos interesa – en agua de mar y no es peligroso para los humanos

Estomatococos – 1 especie. Crecen bien en KA (cualquier cosa puede crecer en KA), pero no crecen en medios salinos. No tienen ningún significado clínico particular. UPMF. La gingivitis y la estomatitis son muy raras (pero más a menudo estas enfermedades son causadas por anaerobios y virus).

S. aureus subsp. áureo

S. aureus subsp. anaerobio: no crece en condiciones aeróbicas (anaerobio estricto)

No hay saprófitos entre los estafilococos. todos oportunistas. Más de 86 formas nosológicas de enfermedades.

S. aureus y S. epidermidis: 45% de todas las estafilococosis cada uno. Comida envenenada- sólo S. aureus (S. epidermidis - sólo puede causar en bebés). Las enterotoxinas son producidas únicamente por S. aureus.

Cada persona tiene de 10 a 12 tipos de estafilococos que viven en la piel.

Las secciones anteriores de la nariz son el biotopo principal. Hay más de todo por unidad de área.

S. epidermidis también puede, junto con S. aureus, provocar brotes de infecciones nosocomiales.

En recién nacidos: conjuntivitis por S. epidermidis anteriormente en Moscú en los años 70; neumonía por S. epidermidis adquirida en el hospital ahora.

Los plásmidos se transmiten a una velocidad de aproximadamente 2 horas (el estafilococo pasó 2 horas en la piel de otra persona y recibió un nuevo plásmido).

Carro.

En las instituciones de maternidad, no se realizan pruebas de rutina para detectar estafilococos (solo durante los brotes) - orden 345. El perfil quirúrgico aún cuenta con 720 pedidos (no realizados en ningún lugar del mundo). El número de infecciones estafilocócicas es el mismo entre la “burguesía” y entre nosotros, independientemente del saneamiento.

Utilizando sistemas de prueba, es posible diferenciar hasta 12-15 tipos de estafilococos y varios tipos de micrococos.

Se cancelaron 691 pedidos de maternidades. La nueva orden 345 no tiene una parte bacteriológica, por lo que en bacteriología todos siguen guiándose por la orden 691.

Se canceló el examen previsto para detectar portadores de estafilococos.

Actualmente existen 5 tipos de estafilococos coagulasa positivos.

coagulasa		maltosa	floculación	Hemólisis en KA con sangre humana.
	día por hora			Casi 100%
			± menos del 50%

noche en blanco y negro

S. aureus no produce coagulasa en muy raras ocasiones, durante cultivos primarios de un paciente con terapia antibiótica masiva. Por lo tanto, volvemos a cultivar la articulación y luego volvemos a agregar plasma. Si no, no es S. aureus.

Pigmento sobre medios con alto contenido proteico y ligeros (WSA, whey protein media)

Entre los estafilococos coagulasa negativos, algunos también pueden formar pigmento. S promagenes: forma un pigmento amarillo en cualquier medio.

Acetoína = acetilmetilcarbinol – reacción VP (Voges-Proskauer)

Su medio con glucosa es semilíquido. Al sembrar en medio salino, siempre son glucosa positivas, al menos en la parte superior de la columna.

La respuesta final negativa al medio semilíquido Su con glucosa se da solo al quinto día.

Si hay gas, asumimos que es una mezcla o que no es estafilococo.

El medio semilíquido con manitol fue excluido en 1974; la respuesta negativa final no se produjo hasta el quinto día. Colocado sólo en la taza: la respuesta está a la mañana siguiente.

Medio sólido con glicerina (1%) (se puede sustituir por cualquier azúcar y alcohol). Nunca se utilizan medios líquidos y semilíquidos para la diferenciación dentro de los géneros Staphylococcus y Micrococcus. Indicador – azul de bromotimol, pH – neutro; o rojo de bromocresol, rojo de bromotimol. Sembramos en placas, hasta 10 cultivos por taza. Franja radial: hasta 6 cultivos por taza. Hay una coloración amarillenta alrededor del estafilococo. Los micrococos no utilizan glicerina.

S. aurecularis en los sistemas de prueba es 95-99% similar a S. aureus y sólo se puede distinguir por la reacción de coagulación del plasma.

Estafilococos coagulasa negativos

En determinadas condiciones pueden producir pigmento.

En los estafilococos, la diferenciación en especies no se puede realizar basándose en 1 o 2 pruebas.

Sólo hay 6-7 especies que crecen en plasma en forma de escamas de Manitol+.

El 100% de S. aureus tiene actividad hemolítica.

S. saprophiticus es muy raro. Cistitis y uretritis en mujeres. joven– sensible a los antibióticos y a los medicamentos de quimioterapia

Los coagulasa negativos no pueden volverse coagulasa positivos.

S. epidermidis nunca es coagulasa positiva, sin importar el orden escrito 720

Una célula sin esporas puede vivir de 10 a 12 días.

La fosfatasa alcalina es característica únicamente de S. epidermidis.

Fosfatasa alcalina: fosfato de paranitrofenol o fosfato de fenolftaleína de pruebas de ALP en bioquímica: 50 mg por 100 ml de agar, hasta 20 cepas por placa.

Fosfato de paranitrofenol → paranitrofenol (amarillo) y el color del medio es amarillo limón.

Fosfato de fenolftaleína → fenolftaleína (incoloro). Alcalinizamos con una solución de amoniaco al 3-10% (la dejamos caer sobre la tapa del vaso, las colonias son carmesí).

Puedes comprar una solución de fosfato de fenolftaleína al 10%. Se conserva en el frigorífico durante años. 0,5 ml de solución por 100 ml de agar.

S. epidermidis es naturalmente sensible a la novobiocina.

Lecitovitelasa (factor yema) – en clasificación internacional No usado, solo con nosotros.

Del 20 al 25% de S. epidermidis son lecitinasa positivas.

80% S. aureus – origen humano- dar lecitovitelasa. S. aureus lecitina negativa – de animales.

También pueden dar otros estafilococos. Es decir, si lecitovitelasa+, entonces es 80% S. aureus y 20% otros estafilococos.

Copas de LSA para transmisión - zona de limpieza (proteasa) - no es importante para nosotros.

La turbidez (predominan las lipasas) tampoco es importante.

Los medios sanguíneos burgueses se elaboran a partir de eritrocitos de oveja. Se pensaba que las cepas humanas de S. aureus producían sólo α-hemotoxina, pero ahora también existe una β-hemotoxina. Esto sólo puede determinarse utilizando glóbulos rojos de oveja.

La β-hemotoxina produce una zona de hemólisis incompleta después de un día, y si luego la guarda en el refrigerador hasta el final de la jornada laboral, la zona se aclarará por completo.

S. aureus produce 2 enzimas

1) ADNasa termolábil (nucleasa): todos los estafilococos y la mayoría de los demás microbios la tienen.

2) ADNasa termoestable (nucleasa): se encuentra únicamente en S. aureus. No se destruye por ebullición o incluso por un breve tratamiento en autoclave.

Y según nuestras órdenes, sólo se detecta ADNasa termolábil (no tiene sentido).

En los alimentos calentados (mientras se oculta el hecho de la PTI), los estafilococos se destruyen, pero las toxinas permanecen. La presencia de ADNasa termoestable puede determinar si S. aureus estaba presente.

Según los pedidos, el ADN altamente polimerizado es de 1 a 2 mg por 1 ml de medio (pH = 8,0). Sembrando un plato con placas (o una inyección). 24 horas. Lo revelamos llenando el vaso con HCl 3N, se forma un precipitado de ADN con HCl, y donde ha actuado la ADNasa vemos una zona de aclarado. En S. aureus su radio es de 10 a 12 mm, en S. epidermidis su radio es de 4 a 5 mm. Alrededor del agujero con el cultivo de S. aureus muerto – 7-8 mm.

S. epidermidis produce sólo ADNasa termolábil, S. aureus produce ambas ADNasas; la zona es más grande.